FerroOrange 亚铁离子荧光探针
简要描述:
FerroOrange 亚铁离子荧光探针FerroOrange是一种特异性检测不稳定的铁(II)离子(Fe2+)的荧光探针,定位在内质网(ER)。一旦与Fe2+反应后,不可逆的生成一种橙色荧光产物(Absmax=542nm,FLmax=572nm,图1. FerroOrange的光谱特征)。
产品时间:2024-05-16
FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针
产品标签
FeRhoNox-1;FerroOrange;Labile ferrous ion不稳定铁(II)离子;Fe2+荧光探针;Ferroptosis铁死亡;C11 BODIPY 581/591脂质过氧化探针;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针 | MX4559-24UG | 24μg | 2480 |
FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针 | MX4559-48UG | 2×24μg | 4580 |
产品描述
FerroOrange是一种特异性检测不稳定的铁(II)离子(Fe2+)的荧光探针,定位在内质网(ER)。一旦与Fe2+反应后,不可逆的生成一种橙色荧光产物(Absmax=542nm,FLmax=572nm,图1. FerroOrange的光谱特征)。铁(III)离子(Fe3+)或其它除铁离子以外的二价金属离子都不会使其荧光增强(见图2. FerroOrange的反应特异性)。FerroOrange也不会与铁蛋白和其它物质中的螯合铁反应。FerroOrange具强细胞膜渗透性和低细胞毒性(见附图3. FerroOrange的细胞毒性测定),非常适用于活细胞成像。
图1. FerroOrange的光谱特征。FerroOrange在0.05M HEPES buffer, pH 7.4内的吸收光谱(左)和荧光光谱。吸收波长在542nm,荧光光谱在572nm。一旦与Fe2+反应,荧光强度显著增加。
图2. FerroOrange的反应特异性。FerroOrange与各种金属离子(左),活性氧或还原剂(右)的反应性。仅当与Fe2+反应,FerroOrange呈强荧光。
保存与运输方法
保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。
运输:冰袋运输。
注意事项
FerroOrange主要定位在内质网(见附图4),但也可能检测细胞质池内的Fe2+,目前针对这一点未做明确评估。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1. 需要自行准备的材料
1.1 细胞培养级DMSO(比如:MS4601A-100ML)
1.2 合适的清洗和观察缓冲液(比如:PBS, pH 7.4;HBSS;无血清培养基等)。不要含酚红。
2. 探针准备
2.1 从冰箱取出FerroOrange,置于室温至少30min,将其置于微量离心机内低速离心。将瓶内的粉末离心到管底后,再开盖。
2.2 往一管FerroOrange(24μg)内加入35μl高质量DMSO,用枪反复吹吸5次或以上,使其wan全溶解即得到1mMFerroOrange储存液。若单次不能用完储存液,请根据单次用量分装,置于-20℃避光保存,一个月内使用。
2.3 于正式实验前,用中性缓冲液或细胞培养基来稀释1mM FerroOrange储存液到所需工作浓度(比如:1μM),工作液需现配现用,尽快用完。【注意:酸性溶液会氧化FerroOrange,严重影响探针的效率】。
3. 染色步骤
3.1于荧光培养皿中接种细胞,于37℃,5% CO2培养箱中孵育过夜。
3.2 染色步骤
4. 荧光检测
对于荧光显微镜:通用的G激发滤片比如Cy3检测用的滤片。
对于激光显微镜和流式细胞仪:532nm,514nm或561nm激光器用于激发。实在没有,亦可用488nm激光器。发射波长为572nm。
相关产品
货号 | 名称 | 规格 |
MX5211-1MG | C11 BODIPY 581/591 脂质过氧化荧光探针 | 1mg |
MX4558-50UG | FeRhoNox-1 (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针 | 50μg |
MX4559-24UG | FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针 | 24μg |
MX5401-1MG | MitoPerOx Mitochondrial Lipid Peroxidation Indicator 线粒体脂质过氧化探针 | 1mg |
MX5402-1MG | BODIPY 558/568 C12脂质转运荧光探针 | 1mg |
附录 FerroOrange的细胞毒性
图3.各种浓度FerroOrange对HepG2细胞的代谢活性。不同浓度的FerroOrange(以1% DMSO作为共溶剂)加入细胞内,培养24h后,用MTT法测定代谢活性。(n=3)
附录FerroOrange的胞内定位
图4.FerroOrange的胞内定位。将FerroOrange(红色), ER Tracker(绿色)和Hoechist 3342(蓝色)加载进入HT-1080细胞并成像观察。FerroOrange主要定位在内质网。Bar:10 μm。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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