BODIPY 665/676脂质过氧化荧光探针

BODIPY 665/676 脂质过氧化荧光探针

产品关键词

BODIPY 665/676；C11 BODIPY 581/591；Lipid Peroxidation Sensor；脂质过氧化感受器；铁死亡（Ferroptosis）；FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator) 亚铁离子荧光探针；

产品信息

产品描述

BODIPY 665/676是一种亲脂性荧光探针，高亲和力结合游离脂肪酸和甘油三酯，具有长波长的吸收波长（λex=665nm）和荧光发射波长（Em=676nm）^[1]。与常用的脂质过氧化探针C11 BODIPY 581/591（MX5211-1MG）相似，BODIPY 665/676容易被过氧化自由基氧化，一旦氧化，发射波长迁移到605nm（λex =580 nm）^[2-4]。BODIPY 665/676最重要的优势在于发射波长是676nm，与绝大部分的荧光素之间无交叉，从而能避免比如自荧光的干扰。BODIPY 665/676具热稳定和高度疏水性特征，从而不会扩散出脂滴。激发器642nm与吸收波长665nm接近，由此，在很低的探针浓度下就能得到强荧光信号^[5]。

产品特征

1） 同义名：(E,E)-3,5-bis-(4-phenyl-1,3-butadienyl)-4,4-difluoro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene

-3,5-双-(4-苯基-1,3-丁二烯基)-4,4-二氟-4-硼拉-3a,4a-二氮杂-s-二茚

2） 分子量：448.32

3） 外观：蓝色固体

4）激发波长：665nm

5）发射波长：676nm

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，收到货至少12个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（活细胞成像分析）

1. 染色工作液的准备

1.1 储存液的制备：将低温保存的BODIPY 665/676干粉从冰箱取出后置于室温至少20min，低速离心后，加入高质量DMSO配制成适宜浓度的储存液，比如：10mM储存液（即：往5mg BODIPY 665/676加入1.1153ml DMSO，充分溶解后混匀即可），根据单次用量分装，≤-20℃保存，尽量避免反复冻融。

2. 染色步骤

3. 图像处理和分析

应用示例（来自文献，仅做参考）

1） 为了测定脂质过氧化（Lipid Peroxidation），MDA-MB 231细胞加入BODIPY 665/676（5 μM）孵育30 min。用PBS清洗细胞两次以去除多余的染料。用VariosKan酶标仪测定荧光值，结果以荧光强度（AU）来展示。【文献来源】：Consoli V, Sorrenti V, Pittalà V, Greish K, D'Amico AG, Romeo G, Intagliata S, Salerno L, Vanella L. Heme Oxygenase Modulation Drives Ferroptosis in TNBC Cells. Int J Mol Sci. 2022 May 20;23(10):5709. doi: 10.3390/ijms23105709. PMID: 35628518; PMCID: PMC9143660.

Fig 1. (A) Fluorescence images of JC-1 staining after 8 h of treatment. (B,C) Evaluation of treatment effects on mitochondrial membrane potential and lipid ROS accumulation (* p < 0.05, ** p < 0.005, vs. CTRL; ^## p < 0.005, ^### p < 0.0005 vs. erastin). The results are expressed as means ± SEM.

2） 为了评估中性脂滴含量和脂质过氧化，细胞用BODIPY 665/676（1μg/ml）于37℃孵育30 min。孵育结束后，细胞用FACSCalibur流式细胞仪分析。【文献来源：Canonico B, Cesarini E, Salucci S, Luchetti F, Falcieri E, Di Sario G, Palma F, Papa S. Defective Autophagy, Mitochondrial Clearance and Lipophagy in Niemann-Pick Type B Lymphocytes. PLoS One. 2016 Oct 31;11(10):e0165780. doi: 10.1371/journal.pone.0165780. PMID: 27798705; PMCID: PMC5087958.】

图 2. 图 6. 通过 BODIPY® 665/676 (BP) 评估细胞内脂质含量和脂肪自噬。(A) 单共焦光学切片（约 0.8 μm 厚度），显示来自对照、营养剥夺和雷帕霉素处理的 tWT 和 tNP 细胞的 LTG（绿色）和 BP（红色）的叠加以及与明场 (BF) 的相对合并。插图显示脂滴与细胞外表面结合，可能是新从细胞中挤出的，或者就在外细胞膜下方，最有可能被细胞胞吐。条形：10μm；插图为 5 μm。(B) 用于对照、营养剥夺和雷帕霉素施用的对照和病理细胞中 LTG 和 BP 的皮尔逊共定位系数 (PCC)。皮尔逊系数源自三个wan全独立的实验，每个实验超过 10 个字段对累积结果有贡献。各值表示为PCC±SD；**与相应对照相比，P < 0.01。通过双向方差分析确定细胞系之间的差异显着（***P < 0.001）。

3）为了测定脂质氧化（lipid Peroxides），细胞用总内皮细胞处理，之后用BODIPY 665/676（2μg/ml）于37℃孵育30 min。之后上流式，用FlowJo 10.0.0软件进行数据分析。【文献来源：Rodrigues, J., Wang, YF., Singh, A. et al. Estrogen enforces the integrity of blood vessels in the bone during pregnancy and menopause. Nat Cardiovasc Res 1, 918–932 (2022). h**ttps*://；doi.org/10.1038/s44161-022-00139-0】

参考文献

1] Canonico B、Cesarini E、Salucci S、Luchetti F、Falcieri E、Di Sario G 等。(2016) Niemann-Pick B 型淋巴细胞中的自噬、线粒体清除和脂噬缺陷。《公共科学图书馆 ONE》11(10)：e0165780。[2] Meyer W、Schmidt J、Busche R、Jacob R、Naim HY。皮肤材料塑料树脂嵌入部分中脂质的演示。J 显微镜。2009年；233：5-9。pmid:19196406 [3] Raudsepp P、Brüggemann DA、Andersen ML。使用亲脂性荧光探针 BODIPY(665/676) 和共焦激光扫描显微镜检测水包油乳液单滴中的自由基。自由基生物医学。2014 年 5 月；70:233-40。doi：10.1016/j.freeradbiomed.2014.02.026。Epub 2014 年 3 月 12 日。PMID：24631488。[4] Raudsepp P、Brüggemann DA、Andersen ML。通过探针 (E,E)-3,5-双(4-苯基-1,3-丁二烯基)-4,4-二氟-4-硼酸检测到水包油乳液液滴之间自由基转移的证据-3a,4a-二氮杂-s-indacene，BODIPY(665/676.)。农业食品化学杂志。2014 年 12 月 24 日；62(51)：12428-35。DOI：10.1021/jf50440

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