细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
简要描述:
本MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)采用*的甲臜溶解液,能够非常好的*甲臜结晶,使检测本底低、灵敏度高,且线性范围宽。
产品时间:2024-05-16
MTT Cell Proliferation Assay Kit
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
搜索关键词:
MTT 噻唑兰;台盼蓝染色法;CCK-8 细胞增殖和毒性检测试剂盒;WST-8;CAS:298-93-1;
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 | MX3005-500T | 500T | 279 |
MX3005-1000T | 1000T | 499 |
基本描述:
噻唑兰(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, 简称MTT,CAS:298-93-1),也称作溴化噻唑蓝四氮唑,是一种黄色染料,已经广泛替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法,用来检测细胞活力、细胞增殖以及毒性分析。MTT是一种可接受氢离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的蓝紫色MTT-甲臜结晶,而死细胞不具此功能。甲臜结晶不能穿透细胞膜,因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。在特定溶剂的作用下*溶解甲臜结晶,然后通过酶标仪测定570 nm附近的吸光度。细胞增殖越多,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
本MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)采用*的甲臜溶解液,能够非常好的*甲臜结晶,使检测本底低、灵敏度高,且线性范围宽。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 保存方法 | 货号(规格) | |
MX3005-500T | MX3005-1000T | |||
MX3005-A | MTT Solution MTT溶液(5mg/ml) | -20℃避光 | 5ml | 2×5ml |
MX3005-B | Formazan Solvent 甲臜溶解液 | -20℃或室温 | 60ml | 2×60ml |
注意事项
使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。①由于96孔板周围一圈容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS、无菌水或培养液;②可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方以缓解蒸发。
MTT溶液在低温下会凝固,请置于室温或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后再使用。
MTT溶液需尽量减少反复冻融的次数,若单次用量很少,建议根据需求分装后置于-20℃保存。MTT溶液颜色如变为灰绿色,请勿使用。
4) 甲臜溶解液当置于-20℃保存需解冻使用,或室温保存产生沉淀,可置于37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须全部溶解后混匀使用。
5) 加入甲臜溶解液后请轻轻混匀,但需注意避免产生泡沫。亦可借助显微镜观察甲臜是否*溶解。
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法(以96孔板为例)
收集对数生长期的细胞,用含血清的培养液配制成单细胞悬液,调整细胞密度,以每孔3000-10,000个细胞接种到96孔板,每孔体积100µl,培养板的边缘孔用无菌PBS填充。设置空白孔和对照孔。
【注①】:通常情况,细胞增殖实验每孔加3000个细胞,细胞毒性实验每孔加6000个细胞。具体每孔所用细胞数目,需根据细胞大小、增殖速度的快慢等来决定。
【注②】:需设置空白孔(不含细胞,含培养液、MTT和甲臜溶解液),对照孔(含细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT和甲臜溶解液),每组设置3个复孔。
37℃,5% CO2继续培养或根据实验具体需求进行培养,一般培养6-24h。
根据实验具体需求,给予0-20µl干预药物处理,37℃,5% CO2继续培养至合适时间。
小心吸掉培养液,每孔加入100µl新鲜培养液,再加入10µl MTT溶液(5 mg/ml),加样时尽量勤换枪头,控制加量误差。继续培养4h。
小心吸掉培养液,每孔加入110µl 甲臜溶解液,置摇床上低速振荡10min,使得结晶物充分溶解。可在光学显微镜下观察结晶物是否*溶解。如果紫色结晶较小或较少,溶解的时间会短些;如果紫色结晶较大或较多,溶解的时间会长些。
在酶标仪上摇匀后,选择570nm,测定吸光度。记录结果,比色以空白调零。
【注①】:对于细胞毒性检测,以未经药物处理细胞的OD值为hao的,然后计算药物处理细胞所占的比率(x),公式如下:OD(未经药物处理细胞)/OD(药物处理细胞)hao的。然后建立直方图。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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