鼠尾胶原蛋白I 细胞培养
简要描述：
鼠尾胶原蛋白I 细胞培养 ，胶原蛋白是结缔组织和内脏器官细胞外基质的主要构造成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布较为广泛。从遗传和结构上胶原蛋白分为许多类型。
产品时间：2024-03-19
打印当前页Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I
搜索关键词：
Extracellular Matrix (ECM) 细胞外基质；Gelatin 明胶；Collagen Type I 胶原蛋白I型；Poly-L-lysine 多聚L-赖氨酸；Fibronectin 纤连蛋白；Matrigel基质胶； CAS：9007-34-5 ；
产品信息：
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I | MX0910-2ML | 2ml (10mg) | 450 |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I | MX0910-10ML | 10ml (50mg) | 2000 |
基本介绍：
胶原蛋白是结缔组织和内脏器官细胞外基质的主要构造成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布为广泛。从遗传和结构上胶原蛋白分为许多类型。胶原蛋白I（Collagen, Type I）是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃，中性pH下自发形成三螺旋骨架，是一种优秀的细胞培养用基质，广泛用于肝细胞、成纤维细胞、脊神经节、肌肉细胞、施万细胞、胚肺细胞、上皮细胞和其他大量细胞系。还能用于研究细胞生长、分化、迁移以及发育过程中的组织形态发生。
懋康生物提供的鼠尾胶原蛋白I是根据Birkedal-Hansen方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷suan氢二钠沉淀等步骤制备。可用于包被细胞培养器皿，培养细胞表面粘附性，特别适合那些在普通培养器皿表面不易贴壁的细胞，比如成纤维细胞、肝细胞等原代细胞。还可用于三维胶的制备，模拟真实的生长环境，使得细胞在三维环境中生长。
本品为溶于6mM HAc的无菌溶液，浓度5mg/ml，每个批次产品皆通过细胞培养测试（包括三维空间培养）以保证质量的可靠性。
注意事项
整个操作请于冰上进行，因室温鼠尾胶原I可迅速成胶，操作过程尽量保持低温。
整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 细胞培养器皿的表面包被
组织培养器皿的表面包被推荐浓度为1-5µg/cm2，起始浓度可首玄5µg/cm2。建议根据具体细胞类型来优化。
1.1 6mM HAc稀释液的制备
本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的无菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建议用6mM HAc溶液做进一步稀释。
配制方法：取34.5µl 冰醋酸（17.4 M）加入100ml双蒸水，充分混匀后即得到6mM HAc溶液，0.22µm滤膜过滤除菌后待用。
1.2 包被步骤
a，根据自身实验体系以及优化后的包被浓度来计算所需的胶原蛋白量，并加入相应孔内，确保胶原蛋白溶液*覆盖表面。
以包被浓度为5µg/cm2，先用6mM HAc稀释液将胶原蛋白（5mg/ml）稀释到合适的中间浓度，如50µg/ml，
然后参考表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表 来加量到各孔内；
以包被浓度为2µg/cm2，先用6mM HAc稀释液将胶原蛋白（5mg/ml）稀释到合适的中间浓度，如12µg/ml，然后参考表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表来加量到各孔内；
表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表
培养皿类型 | 每孔/皿表面积（cm2） | 当包被浓度：2µg/cm2，中间稀释浓度：12µg/ml，加入该稀释液的体积（µl） | 当包被浓度：5µg/cm2，中间稀释浓度：50µg/ml，加入该稀释液的体积（µl） |
96 well | 0.3 | 50 | 30 |
24 well | 1.9 | 300 | 190 |
12 well | 3.8 | 600 | 380 |
6 well | 9.5 | 1580 | 950 |
35mm | 8 | 1330 | 800 |
60mm | 21 | 3500 | 2100 |
100mm | 55 | 9170 | 5500 |
b，室温孵育1h，小心吸掉多余液体，用无菌PBS清洗3~4次后直接使用。或者加完胶原蛋白溶液后，在超净台内开盖过夜晾干。无菌条件下，包被好的器皿在4-25℃至少可保存3个月。
2. 三维胶原的制备
当鼠尾胶原蛋白I使用浓度>1mg/ml，pH 7.0左右皆可形成具有一定强度的三维胶，建议成胶浓度为1-2 mg/ml。
由于本品是以溶于6mM HAc的无菌溶液形式提供，在成胶过程需先加入0.06倍体积的0.1M NaOH中和。
2.1 需要溶液准备（无菌、预冷）
2.2 三维胶原制备（不含细胞）（以配制1ml，1mg/ml三维胶为例）：
2.3 三维胶原制备（含细胞）（以配制1ml，1mg/ml三维胶为例）：
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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