F-DH5a化学感受态细胞

F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

产品标签：

F-DH5a；F-*0；DH10B；JM109；EPI400；羧苄；卡那霉素；链霉素；

产品订购：

【好消息】：见我司的感受态细胞*活动。买感受态细胞得京东卡，发表使用评论，赢红包，双重惊喜，行动起来啦。

产品组分：

菌株描述

DH5a菌株基因型：F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA

产品描述

本品是大肠杆菌DH5a菌株经特殊工艺制作所得的快速转化感受态细胞，无需42℃热激，37℃孵育步骤，只需冰浴，10min内能完成转化、涂板步骤。经pUC19质粒检测转化效率可达1~5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

注意事项

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

一、  快速转化操作（10min）

1.1    提前15min将用到的筛选培养平板拿到37℃预热。

1.2    取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出，迅速插入冰中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），并用手弹打管底轻轻混匀，冰中静置5min。

1.3    用移液枪将感受态细胞-DNA混合物转移到37℃预热的LB筛选培养平板上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，表面无水渍。

1.4    将平板倒置于37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选，至少培养15h。

【注意】：F-DH5a感受态细胞涂含氨苄或羧苄筛选培养平板时效率搞，若涂卡那霉素或其他抗生素平板，转化效率会下降（由于没有孵育步骤，卡那霉素等对菌体毒性较大）。若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率，按照快速热激转化操作。

二、  快速热激转化操作（25min，能提高转化效率）

【注意】：当质粒＞7kb，通过以下热激转化操作：取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出，迅速插入冰中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），并用手管底轻轻混匀，冰中静置20min。

42℃水浴热激45s，迅速放回冰上并静置2min。加入700μl 无菌的LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养30min。之后涂板。

相关产品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。

F-DH5a化学感受态细胞

F-DH5a化学感受态细胞