MKRed核酸凝胶染料 核酸纯化
简要描述:
MKRed核酸凝胶染料 核酸纯化(效果同GelRed,DuRed)核酸电泳,是一种*的油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内。不易挥发升华,人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果也表明MKred在凝胶染色浓度下*无诱变性,相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。
产品时间:2024-03-26
MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)
MKRed核酸凝胶染料(效果同GelRed,DuRed)
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产品关键词:
MKRed 核酸凝胶染料;GelRed;DuRed;Ethidium Bromide, EB;Ames Test 艾姆斯试验法;GoldView;SYBR Green I;
订购信息:【活动期间按照活动价执行】
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) MKRed核酸凝胶染料(效果同GelRed) | MF0754-500UL | 500µl | 460 |
MF0754-2500UL | 5×500µl | 1850 |
产品特征
。。。传统核酸染料(Ethidium Bromide, EB,溴化乙锭)的无毒安全替代品,经艾姆斯试验法测试认证。
。。。新型核酸染料(GelRed,DuRed)的同等优质替代品,经实验室内部测试认证【见图1】。
产品优势
。。。安全无毒:*油性大分子,无法穿透细胞膜进入细胞;不易挥发,人体不会吸入;艾姆斯试验法(Ames Test)表明凝胶染色浓度下*没有诱变性,与EB的强致癌性相比,是一种安全无毒的核酸染料。
。。。适用范围广:适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳的dsDNA, ssDNA以及RNA染色。
。。。操作灵活简单:可选择电泳前(胶染法)或电泳后(泡染法)染色。使用方法同EB,GelRed,DuRed
。。。检测方便:与EB具相同的光谱特征,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪即可,无需更改滤光片和观察装置。标准EB滤光片或SYBR滤光片都适用。
。。。灵敏度高,对核酸迁移影响小:适用于各种大小片段的电泳染色。电泳条带不易*,片段不易迁移,不像SYBR Green I,染料浓度高时会引起条带弯曲和迁移现象【见附件 常见核酸染料的性能比较】。
。。。稳定性高:室温稳定保存一年,长期不用可置于+4℃保存二年。
。。。易去除,兼容性强:用酚/lv仿提取和乙醇沉淀,或商业化的胶回收试剂盒可轻易去除核酸中的染料;与常见的下游应用如克隆,连接和测序兼容。
应用示例:
图1. GelRed(Biotium)与MKRed(MKbio, Shanghai)的使用比较。1-6是不同上样量的Marker III(依次为100ng、50ng、12.5ng、6.25ng、3.125ng);7-11是不同上样量的血液基因组DNA(依次为200ng、150ng、100ng、50ng、25g)。凝胶配制条件:往25ml凝胶溶液加入0.25g琼脂糖,微波炉加热至充分溶解,冷却至60℃左右,加入2μl GelRed或MKRed染料,混匀,倒胶。电泳条件:1%琼脂糖凝胶,150V,20min。
图2. EB(MPbio, USA)与MKRed(MKbio, Shanghai)的使用比较。1-5是不同管菌液的PCR产物(目的片段500bp左右)。凝胶配制条件:往20ml凝胶溶液加入0.2g琼脂糖,微波炉加热至充分溶解,冷却至60℃左右,加入2μl EB或MKRed染料,混匀,倒胶。电泳条件:1%琼脂糖凝胶,150V,25min。
常用核酸染料的性能比较
| MKRed(同GelRed/DuRed) | SYBR Green I | Goldview | EB |
产品货号 | MF0754-500UL | MF0751-100UL | MF0753-1ML | MF0756-1G |
灵敏度 | 高 | 高 | 低 | 低 |
稳定性 | 高 | 低 | 高 | 高 |
对核酸迁移的影响 | 条带不易弯曲,片段不易迁移 | 染料浓度高时,条带易*,迁移现象明显 | 条带不易弯曲,片段不易迁移 | 条带不易弯曲,片段不易迁移 |
安全性 | *油性大分子,不挥发升华,不易吸入人体,不能穿透细胞膜,安全无毒。Ames Test表明染色浓度*无诱变性,无致癌毒性。 | 花箐染料,能穿透细胞膜,但容易生物降解,不会在体内残留,安全无毒。 | 主要成分为吖啶橙,一种煤焦油提取物,具高毒,致癌,高诱变性。 易挥发升华,易吸入人体,能进入活细胞,不易被生物降解,长期留在体内。 | 分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,体内长期残留。Ames Test表明容易引起突变,是强诱变剂,高致癌性。 |
适用性 | 通用大小片段电泳染色。 与EB具相同的光谱特性,无需更改滤光片和观察装置。标准EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用普通紫外凝胶透射仪观察即可,300nm处得zuijia激发。 | 100bp以上电泳染色。适用于254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。 | 100bp以上电泳染色。使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。 | 100bp以上电泳染色。使用普通紫外凝胶透射仪观察即可。 |
保存与运输方法
保存:+4℃避光干燥保存,2年有效。
运输:室温运输。
注意事项
1. MKRed虽然为安全无毒的核酸染料,对人无伤害,但请科研人员操作过程中注意防护,尽量避免与染料的直接接触。且染料的废弃需符合当地规定。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、胶染法(同EB,电泳前染色)
制胶时加入MKRed 核酸染料(每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL MKRed 10,000×水溶液)。
按照常规方法进行电泳。
用普通紫外凝胶透射仪(300nm处有zui加激发)观察以及标准EB滤光片成像。
【注意】
此方法比较节省染料,500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
由于MKRed具有良好的热稳定性,可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将MKRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。
MKRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
二、泡染法(电泳后染色)
按照常规方法进行电泳。
用H2O将MKRed 10,000×水溶液稀释约3,300倍制成3× 染色液(例如:将15μL MKRed 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl混合,之后加到45mL H2O中混匀)。【注意】:染色液中加入0.1M NaCl能提高灵敏度,但如果胶染色再次使用会比较容易有沉淀产生。
将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,zui加染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,染色时间通常介于30min-1h,丙烯酰胺含量增加,染色时间延长。
不需要脱色,但若有需要可用水清洗一下凝胶以降低背景。
用普通紫外凝胶透射仪(300nm处有zui加激发)观察以及标准EB滤光片成像。
【注意】
用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
3× MKRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
常见问题【见懋康内容】
MKRed能用于ssDNA或RNA染色吗?
MKRed与下游应用如克隆,连接或测序兼容吗?
MKRed与什么上样缓冲液兼容?
是否能将MKRed加入DNA中,然后进行电泳检测?使用浓度多少?
哪种发射滤片适用于MKRed?
电泳后的MKRed预制胶能重复使用?
MKRed的工作原理是什么?化学结构是什么?
电泳过程中MKRed会发生迁移吗?
MKRed需要避光使用吗?
不小心将MKRed暴露在室内光下,是否还能用?
MKRed能用于甲醛、聚丙烯酰胺、DGGE、EMSA或PFGE凝胶?
MKRed能用于彗星实验(COMET assay)?
——Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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MKRed核酸凝胶染料 核酸纯化
MKRed核酸凝胶染料 核酸纯化