Trypsin 1:250
简要描述:
Trypsin 1:250 猪源胰蛋白酶1:250 细胞分离与流式分析,CAS:9002-07-7,来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶,由223个氨基酸残基组成的单链多肽,底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端,当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外,当切割位点任一边紧邻酸性残基,胰酶水解速率也会减缓。
产品时间:2024-03-21
Trypsin 1:250, Powder (Porcine)
猪源胰蛋白酶1:250(粉末)
产品标签
Trypsin 1:250 胰酶;Collagenase NB 4 胶原酶NB4(标准级别);Trypsin-EDTA (0.25%);Dispase II 中性蛋白酶;Roche;CAS:9001-12-1;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Trypsin 1:250 (Porcine) 猪源胰蛋白酶1:250(粉末) | MX2002-25G | 25g | 135 |
Trypsin 1:250 (Porcine) 猪源胰蛋白酶1:250(粉末) | MX2002-100G | 100g | 360 |
产品描述
胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),CAS:9002-07-7,来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶,由223个氨基酸残基组成的单链多肽,底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端,当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外,当切割位点任一边紧邻酸性残基,胰酶水解速率也会减缓。
胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),以无活性的胰蛋白酶原(Trypsinogen)形式分泌于胰腺中,通过切割其末端六肽而得到活化,产生天然单链形式的β-胰酶(β-Trypsin),随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin(由二硫键共价连接的二条肽链组成)。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制,有1)来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂;2)银离子;3)有机磷化合物,如氟磷酸异丙酯DFP;4)特定蛋白酶抑制剂,如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等;
本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶冻干粉,经γ射线处理灭活病毒,经过猪细小病毒和支原体检测。基于标准测定方法的酶活力为250 units/mg,即1:250。广泛用于细胞传代,对贴壁细胞进行消化以制备单细胞悬液,常用的工作浓度是0.025-0.5%(w/v)。也可联合其他蛋白酶如胶原酶、弹性蛋白酶一起使用,以消化组织。
产品特性
- EC NO:3.4.21.4
- CAS NO:9002-07-7
- 同义名:Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;
- 分子量:23.4 kDa
- 螯合剂:无EDTA
- 酚红指示剂:无酚红
- 外观:白色至类白色粉末
- 溶解性:溶于水,几乎不溶于乙醇和甘油
- zuijia工作温度:37°C
- zuijia工作pH:7.0-9.0
- 酶活性:根据美国药典专论规定的胰蛋白酶活性测定条件(25°C 10 min, pH 7.6),1 g 胰蛋白酶能消化 250 g 酪蛋白底物。
使用方法
1. 胰酶储存液(2.5%,w/v)的配制
1.1 称取2.5g胰酶粉末溶于100ml 不含钙镁的平衡盐缓冲液,如HBSS(Hank′s Balanced Salt Solution),并调整pH在7.4-7.6,此时得到的即2.5%胰酶储存液,置于4℃短时间保存,3个月相对稳定。建议分装冻存,利于长期保存。解冻后可能会出现少量沉淀,属于正常现象,不会影响使用效力。
1.2 细胞的消化可以直接用胰酶溶液,但常使用胰酶-EDTA溶液,因为EDTA是一种II价金属离子螯合剂,
【①】:胰酶用于细胞传代的工作浓度范围为0.025%-0.5%,具体浓度的选择主要受胰酶活性、孵育时间和细胞系类型几个方面影响。若用过高浓度消化过长时间,会破坏细胞膜结构,进而杀死细胞。当对使用浓度把握不大,建议先使用低浓度消化,慢慢的摸索出合适的工作浓度。
【注②】:胰酶-EDTA溶液的配制(仅作参考,根据需要的实际胰酶浓度来调整)
无Ca2+、Mg2+及酚红的平衡盐溶液 | 485ml |
胰酶储存液(2.5%,w/v) | 10 ml |
EDTA溶液(2%,w/v) |
|
2. 贴壁细胞消化(培养板)【详见maokangbio】
注意事项
1)胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换,
1 BAEE Unit:在25℃,pH 7.6 的条件下,以BAEE为底物,3.2 ml的反应体系中,A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个酶活单位。
1 TAME Unit: 在25℃,pH 8.2,0.001M Ca2+条件下,每分钟水解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester(TAME)的用量。
1 USP Unit:在条件下,每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。
1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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Trypsin 1:250 猪源胰蛋白酶1:250 细胞分离与流式分析
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