IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
简要描述:
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,诱导细菌lac或tac操纵子调控的基因转录,尤其是水解酶β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)。一旦表达,β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖为单糖。IPTG通常用于β-gal活性分析,当含大肠杆菌来源lacZ基因的载体转染进入细胞后,编码表达β-gal,细胞裂解后,通过催化底物ONPG的颜色反应即可定量分析活性。
产品时间:2024-03-25
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷/重组蛋白表达诱导物/启动lacZ基因
产品关键词:
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷;X-gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷;β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal);lac repressor 乳糖阻遏物;lacZ Operon lacZ操纵子;Blue-white Screening 蓝白斑筛选;CAS NO.: 367-93-1
基本描述:
IPTG,英文全名Isopropyl-beta-D-thiogalactoside,中文全名异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,CAS NO:367-93-1,诱导细菌lac或tac操纵子调控的基因转录,尤其是水解酶β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)。一旦表达,β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖为单糖。IPTG通常用于β-gal活性分析,当含大肠杆菌来源lacZ基因的载体转染进入细胞后,编码表达β-gal,细胞裂解后,通过催化底物ONPG的颜色反应即可定量分析活性。IPTG也是硫代半乳糖苷转乙酰基酶的底物,文献报道还能诱导合成细菌青霉素酶。体内研究IPTG的一个重要优势在于,IPTG不会大肠杆菌所代谢,IPTG浓度和lac p/o控制基因表达都保持稳定。
IPTG诱导lacZ表达的作用机制:
IPTG的主要生理功能:
1)β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)活性检测
β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)由大肠杆菌lacZ基因编码,是zui常用的一种报告酶,用来研究哺乳动物细胞的基因表达,蛋白-蛋白相互作用,以及标准化转染效率。
检测原理:IPTG诱导lacZ基因表达β-半乳糖苷酶(β-gal),细胞裂解后,体系中加入无色的ONPG(邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷),被β-gal水解为邻硝基苯酚(o-nitrophenol),生成黄色(420nm)。颜色反应的强度与β-gal活性成正比
2)蓝白斑筛选(Blue-white screening)
IPTG普遍用在需要诱导β-gal活性的克隆步骤中,zui为常见的就是和X-gal联合使用进行蓝白斑克隆筛选,或与Magenta-gal联合使用进行红/白斑克隆筛选。
作用机理: 当目的基因插入载体lacZ基因,破坏β-gal表达并阻止其表达。细菌在含X-gal的培养基上生长,β-gal水解此底物生成一不可溶蓝色产物,菌落呈蓝色。若β-gal不能表达,细菌克隆则无法催化X-gal底物,菌落呈白色,以此区分转化重组载体或非重组载体的克隆子。
3)重组蛋白的诱导表达
IPTG也可用于重组蛋白的诱导表达。在这些体系中,待研究蛋白在IPTG诱导型启动子下游编码。IPTG诱导待研究蛋白表达,对细胞裂解后,使用一系列合适方法来纯化蛋白,如His-tag或GST-tag纯化系统(融合相应标签的重组蛋白)。
产品特性
1)CAS NO:367-93-1
2)英文同义名:Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; IPTG;
3)中文同义名:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷;异丙基 β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷;
4)分子式:C9H18O5S
5) 分子量:238.30 g/mol
6) 纯度:≥99%(基于干重,HPLC)
7) 外观:白色结晶粉末
8) 杂质:≤0.1% Dioxane(二氧六环)
9) 溶解性:溶于水、乙醇
10)化学结构:
使用方法【详见maokangbio】
- IPTG储存液配制
- 蓝白斑筛选方法
- IPTG诱导重组蛋白的表达
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货号 | 产品名称 | CAS NO. | 规格 | 价格(元) | 货期 |
MF2002-5G | IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 5g | 195 | 现货 |
MF2002-10G | IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 10g | 350 | 现货 |
MF2002-100G | IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 100g | 1800 | 现货 |
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货号 | 产品名称 | CAS NO. | 规格 | 价格(元) | 货期 |
MM2005-1G | ONPG 邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷 | 369-07-3 | 1g | 115 | 现货 |
MS5510-10G | DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 | 3483-12-3 | 10g | 380 | 现货 |
MS0839-5G | D-(-)-Arabinose D-(-)-阿拉伯糖 | 10323-20-3 | 5g | 70 | 现货 |
MP1610-1ML | 广谱型蛋白酶抑制剂混合物(不含EDTA,100× DMSO储液) | / | 1ml | 380 | 现货 |
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷