CCK-8 细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明
1. 向各孔中加入100 μl细胞悬液。a)
2. 在37℃下预孵育培养板。b)
3. 向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10 μl。
4. 37℃下孵育。
5. 向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液d)。
6. 37℃下孵育1-4小时。e)
7. 测定450 nm处的OD值。
a) 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。
b) 建议使用CO2培养箱guo夜预培养。
c) 使用培养基或PBS来制备溶液。
d) 如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CCK-8的待测溶液在450 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入CCK-8 ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100 μl培养基和10 μl CCK-8进行检测。
e) 白细胞可能需要培养较长时间。