潮霉素B Hygromycin B稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，将细胞稀释至丰度不超过25%。
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
潮霉素B Hygromycin B时的注意事项
1) 潮霉素B Hygromycin B的抗性基因(hyg或hph)除了来自E. Coli.之外，还发现于其他的菌株，包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
2) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。