CCK-8 细胞增殖及毒性检测,是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK-8 细胞增殖及毒性检测应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以CCK-8 细胞增殖及毒性检测为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
CCK-8 细胞增殖及毒性检测方法以及步骤
1) 在96孔板中配制100μl 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
2)向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
3)将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
4)向每孔加入 10μl CCK8 溶液(Engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
5)将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
6)用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
7)如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μl 0.1 M HCl溶液或者1%w/vSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。